草鱼是中国淡水养殖的四大家鱼之一,生长快,个体大,肉嫩,味美,深受消费者的喜爱。草鱼的人工养殖密度大、产量高、对饵料要求较高。在集约化养殖过程中,人们为了促进草鱼生长、降低细菌病发生,往往在饲料中添加抗生素,若长期这样下去,草鱼会产生耐药性,养殖风险增大,鱼肉产品中的抗生素残留量也会增加,影响消费者的身体健康。从2006年开始,欧美一些发达国家禁止在饲料中添加抗生素,主张将抗生素的作用回归到疾病治疗层面上。
为了研发安全高效的饲用抗生素替代品,我国科技界从多种途径开展了相关研究工作,探讨了壳聚糖复合物(刘鸿艳等,2009)、果寡糖(卢明淼等,2010)、复方中草药添加剂(田海军,2010)、酵母细胞壁、木寡糖(杨小林等,2010)对草鱼的影响,抗菌肽对罗非鱼幼鱼(黄沧海等,2010)、凡纳滨对虾(宋理平等,2010)、断奶仔猪(温刘发等,2001)、母猪(李永新等,2009)和肉鸡(黄永彤等,2004)的影响,取得了有益的试验结果,但抗菌肽对草鱼生长性能的影响尚未见报道。本研究在露天鱼池条件下,开展了抗菌肽和黄霉素对草鱼生长性能的大群饲养试验,旨在比较饲用抗菌肽与黄霉素的应用效果,以实现草鱼健康养殖和产品安全优质的目的。
1 材料与方法
1.1 试验设计与日粮
抗菌肽(天蚕素)由国家饲料工程技术研究中心和北京中农颖泰生物技术有限公司生产,北京龙科方舟生物工程技术中心提供。黄霉素(牧乐旺)由中牧实业股份公司生产。
试验设计:选用投放日期相同、体重相近的健康草鱼60000尾,分成3个试验组,分别在独立的露天鱼池中饲养。试验基础日粮参照SC/T 1024-2002 草鱼配合饲料配制,然后加工成颗粒饲料待用。对照组为黄霉素组,在基础日粮中添加8 mg/kg黄霉素;抗菌肽试验组分为两个组,分别在基础日粮中添加100 mg/kg和150 mg/kg的抗菌肽(天蚕素)。
注:预混料为每千克日粮提供:维生素A 27500 IU,维生素D3 6250 IU,维生素E 250 IU,维生素K 26.2 mg,硫胺素33.3 mg,核黄素55 mg,泛酸145 mg,烟酸290 mg,维生素B12 0.1 mg,叶酸5 mg,生物素0.5 mg,吡哆醇6.5 mg,肌醇500 mg,维生素C 450 mg;锰10 mg,铁100 mg,锌22 mg,铜5 mg,碘0.7 mg,钴0.4 mg,硒0.2 mg。干物质、粗蛋白质、钙、总磷、食盐、粗纤维、粗灰分为实测值,赖氨酸为计算值。
1.2 试验地点和时间
在北京市顺义区大三渠草鱼养殖基地进行试验,从2016年6月2日开始,到2016年7月19日试验结束,试验期49 d。
1.3 饲养管理
试验草鱼分别饲养在3个池塘中,这3个池塘按南北向依次排列,饲养密度为每亩2000尾,池塘采用自然光照,水温25-28℃,pH 7.2-8.0。按草鱼体重的2 %投喂饲料,每日05:00、09:00、14:00和18:00投喂4次。试验期间每天记录投料量和死亡鱼数量,观察采食及鱼群的活动情况。
1.4 数据处理
试验开始和结束时,每组随机抽取50尾草鱼,测定体重、体长和体宽;试验结束后,计算草鱼的成活率、饵料系数、相对增重率和肥满度,相关公式:
成活率=存活鱼数÷放养尾数×100%
饵料系数=摄食量÷增重量
相对增重率(%)=增重/初始重×100%
肥满度=体重(g)/体长3(cm)×100%
1.5 统计分析
试验数据采用统计软件SPSS 13.0进行分析和多重比较,试验结果以平均值±标准差表示。
2 结果与分析
2.1 添加抗菌肽对草鱼增重和相对增重率的影响
由此可见,添加抗菌肽的草鱼增重较快,与对照组相比,增重和相对增重率达到了差异显着水平(P<0.05),以试验2组(基础日粮中添加150 mg/kg抗菌肽)的增重效果最好,49 d的期内增重和相对增重率分别达到362.63 g和159.41%。
2.2 添加抗菌肽对草鱼成活率和肥满度的影响
由此可见,试验期内各处理组的草鱼成活率在99.51%-99.55%之间,组间差异不显着,以试验2组(基础日粮中添加150 mg/kg抗菌肽)的成活率最高;试验结束时,各组草鱼的平均肥满度在1.72-1.75之间,组间差异不显着,但试验2组的肥满度略好于其他组。
2.3 添加抗菌肽对草鱼饵料系数的影响
由此可见,对照组的饵料系数为1.49,试验1组的饵料系数为1.23,试验2组的饵料系数为1.21。 试验1组、2组与对照组相比,饵料系数分别降低了17.45%和18.79%,可见,添加抗菌肽可以提高草鱼饲料的利用率,降低养殖成本。
注:同列数据肩标字母不同者表示差异显着( P<0.05) ,字母相同者或未标者差异不显着( P>0.05 ) 。
3 讨论
随着草鱼集约化、高密度的养殖方式推广,养殖者通过向饲料中添加抗生素来促进草鱼生长、防治细菌病。从短期效果来看,取得了一定成效;但长远来看,草鱼耐药性不断提高,药物残留和水体微生态系统破坏等副作用越来越突出。再加之欧美等发达国家已禁止在饲料中添加抗生素,我国消费者对食品安全的呼声也越来越高。因此,抗生素作为饲料添加剂已面临严峻的挑战,开发和应用绿色高效的抗生素替代品已成为科研人员的重要任务。
我国科技人员已从不同途径筛选了饲用抗生素替代品,并检验了其应用效果。卢明淼等(2010)开展了果寡糖对草鱼非特异性免疫功能的影响试验,发现饲料中添加2 g/kg的果寡糖,可以提高草鱼的免疫指标。杨小林等(2010)研究了酵母细胞壁、木寡糖对草鱼生长性能的影响,在饲料中添加0.07%的酵母细胞壁,使草鱼的增重率、饵料系数和成活率得到明显改善。刘鸿艳等(2009)用壳聚糖复合物饲喂草鱼,每吨饲料中添加500g的壳聚糖复合物,显着提高了草鱼的增重率,降低了饵料系数。田海军(2010)将大黄、黄芩、白术、党参、板蓝根等10余味中草药粉碎过筛后制成复方添加剂,按1%、2%、3%的比例添加于基础饲料中,然后制成颗粒料投喂草鱼,发现草鱼的血细胞吞噬率、吞噬指数、血清溶菌酶活力和免疫保护率均得到提高,以2%添加量的效果最好。
近几年,抗菌肽的研究越来越深入,越来越引起人们的重视。抗菌肽是一类小分子多肽,对致病菌具有很强的杀伤作用,而对乳酸杆菌、双歧杆菌等有益菌没有伤害,且不易产生耐药突变株。传统的抗生素是通过阻断生物大分子的合成来杀灭细菌的,而抗菌肽是通过裂解细菌的细胞膜使其内容物外泄而导致细菌死亡的,两者的作用机理完全不同。
从水产动物的应用效果来看,黄沧海等(2010)发现抗菌肽和黄霉素在促进罗非鱼幼鱼生长和抑制病原菌方面有类似的结果,不同添加剂量的抗菌肽(50、100、150 mg/kg)对罗非鱼幼鱼的生长性能无显着影响。宋理平等(2010)在凡纳滨对虾的基础饲料中添加10 g/kg抗菌肽,饲喂30 d后,凡纳滨对虾的相对增重率、成活率和免疫保护率得到显着提高,但饲料系数无显着差异。本研究在草鱼饲料中添加100 mg/kg和150 mg/kg的抗菌肽,取得了较好的增重效果,并且添加150 mg/kg抗菌肽的效果更好,但抗菌肽的不同添加量对草鱼成活率和肥满度无显着影响。以上这三个试验结果都说明:抗菌肽具有促进水产动物增重的功能,但试验结果之间也有一定差异,这可能是动物不同、饲养环境不同、抗菌肽种类或纯度不同等原因造成的。
抗菌肽在猪、鸡上也有应用试验,温刘发等(2001)发现饲用抗菌肽对断奶仔猪的抗腹泻效果好于抗生素,但高剂量的抗菌肽反而降低了仔猪的生长速度。李永新等(2009)在母猪产前35d的饲料中添加0.3%的抗菌肽,发现试验母猪的窝产仔数和活仔重均高于对照组,仔猪腹泻率显着降低,断奶成活率比对照组提高了l6.10%。黄永彤等(2004)发现饲用抗菌肽能促进肉鸡生长,提高免疫力,但与中草药和抗生素相比,在出栏率、平均体重、饲料效率等方面均无显着差异。
总体来看,在饲料中添加抗菌肽,能不同程度地提高经济动物的生产性能,对饲料利用率、免疫力和成活率等指标的影响,与抗生素的作用效果相当。因此,各养殖场和饲料企业可以根据具体情况,在饲料中添加适量的抗菌肽,以替代饲用抗生素的使用。